Els Materials
El flascó de cultiu Manipulació de mosques Obtenció de femelles verges

Una cambra de cultiu
Nosaltres fem servir un armari empotrat del laboratori on hem instal·lat bombetes connectades a un termostat per calefacció. Un got d'aigua proporciona humitat i llegim la temperatura en un termòmetre de màxima i mínima. El sistema oscil·la alguns graus però es manté bé entre 22 i 25 ºC.
No fungible
Pinces, pinzells fins, flascons de cultiu, flascons eteritzadors.
Olla a pressió, taps d'escuma. Òptica: Lupes de mà i lupes binoculars
 
1. flascó eteritzador
2. èter dietílic
3. flascons de cultiu, un amb medi
    estèril i l'altre amb tap d'escuma.
4. lupa de mà
5. pinça i pinzells
6. càpsula de Petri
Fungible
Farina de blat de moro, llevat de pastisser, etanol, sacarosa, nipagín, agar-agar, èter dietílic, cotó i gassa, rodet de fil de cosir.

Com esterilitzar els flascons
Cada any en acabar l'experiment els rentem i endrecem.
El dia abans de fer una sembra el bullim 20' en olla a pressió i els deixem assecar girats cap per avall, guardant los en aquesta posició fins fer los servir.

El medi de cultiu
o com preparar les farinetes (aliment per a larves)
Les proporcions serveixen per uns cent flascons de cultiu:
 

preparat A
250g de farina de blat de moro dissolts en 1.100cc d'aigua dest.

preparat B

6g de Nipagín (antifúngic d'ús alimentari) dissolts en 60cc d'etanol.

preparat C

2.300cc d'aigua dest. + 40g d'agar-agar + 6 cullerades soperes de sucre

Remenar C en fred i posar-ho al foc fins l'ebullició (remenant!).

Quan C arrenca el bull afegir-hi el preparat A i mantenir l'ebullició durant 15' (si espessa massa no cal arribar-hi, en 10' ja farem).

Retirar del foc i afegir-hi el preparat B. Remoure la mescla.
 
En calent, abans que espessin les farinetes, posar al fons de cada flascó esterilitzat d'1 a 2cm de pasta. Tapar la boca del flascó amb paper d'alumini i deixar refredar. Poden  conservar-se alguns dies en frigorífic.

Com preparar un flascó de sembra

Cal treure el paper d'alumini i assecar les parets interiors del flascó amb un paper net (sovint hi ha condensació). Com aliment pels adults afegim un polsim de llevat de panificació (poc i esmicolat) vigilant que no toqui les parets. Hi posem a continuació un paper no absorbent replegat, per tal d'augmentar la superfície interior del flascó. Substituïm el paper d'alumini per un tap d'escuma (deixa passar l'aire però no les mosques. Finalment l'etiquetem amb claredat (nom de la soca o creuament, data, grup responsable)

Com manipular les mosques
 
Ús del pinzell
Per desplaçar, manipular o agafar les mosques cal fer-ho amb un pinzell.

 

Ús de l'anestèsia
Al realitzar observacions o encreuaments experimentals cal anestesiar prèviament les mosques. Farem servir l'eteritzador que té un tap de cotó que més endavant podrem mullar amb unes gotes d'èter dietílic (volàtil i inflamable!!).
El procediment a seguir és el següent:

Passar les mosques al flascó eteritzador

Agafarem el pot de cultiu i encara tapat donarem uns cops secs sobre la taula, així evitarem que les mosques surtin, tot seguit el destaparem i li posarem a sobre l'eteritzador encarant les dues boques.
Subjectarem les dues boques amb la mà per tal que no es separin i deixarem que les mosques passin a l'eteritzador:

mètode a: amb l'eteritzador en posició inferior, donarem copets laterals al pot de cultiu comprovant que les mosques vagin baixant.
 
mètode b: apuntant l'eteritzador
cap una bombeta aprofitant així
el fototropisme positiu de les mosques.

Quan hi hagi el nombre suficient de mosques separarem els dos pots i els taparem ràpidament.


Els alumnes solen abusar dels cops i la farineta es desplaça enganxant-ho tot. També tendeixen a fer passar massa mosques i després es desperten quan encara no han enllestit la manipulació.

Eteritzar les mosques

 
Un cop sec amb l'eteritzador sobre la taula farà baixar les mosques, moment que aprofitarem per posar dues o tres gotes d'èter en el tap de cotó, caldrà esperar que les mosques es dormin. Una sobre exposició podrà matar les (es nota perquè les ales queden excessivament separades del cos).
Observar les mosques
 
Les mosques adormides podran posar-se sobre un paper blanc i transportar les a la lupa binocular per identificar les i sexar les.

Després d'observar les mosques mai s'han de tornar al flascó, seran dipositades en un pot ple meitat d'aigua, meitat d'etanol que servirà de dipòsit

Si cal utilitzar les mosques adormides en una nova sembra, no els posarem directament sobre les farinetes ja que hi quedarien enganxades, utilitzarem un cons de paper on amb el pinzell hi haurem dipositat en cura les mosques.
 

Com aconseguir femelles immadures (verges)
Sabem que els adults no són madurs sexualment fins que no han passat de sis a vuit hores des de la sortida de la pupa. De vegades en un creuament necessitarem assegurar-nos que les femelles no han estat encara fecundades, ens caldrà seleccionar femelles que faci menys de vuit hores que han sortit de la pupa.
Vegeu-ne el procediment per aconseguir-ho.