
Una
cambra de cultiu
Nosaltres fem servir un
armari empotrat del laboratori on hem instal·lat bombetes connectades
a un termostat per calefacció. Un got d'aigua proporciona humitat
i llegim la temperatura en un termòmetre de màxima i mínima.
El sistema oscil·la alguns graus però es manté bé
entre 22 i 25 ºC.
No
fungible
Pinces, pinzells fins, flascons
de cultiu, flascons eteritzadors.
Olla a pressió, taps
d'escuma. Òptica: Lupes de mà
i lupes binoculars
|
1.
flascó eteritzador
2.
èter dietílic
3.
flascons de cultiu, un amb medi
estèril i l'altre amb tap d'escuma.
4.
lupa de mà
5.
pinça i pinzells
6.
càpsula de Petri |
Fungible
Farina de blat de moro,
llevat de pastisser, etanol, sacarosa, nipagín, agar-agar, èter
dietílic, cotó i gassa, rodet de fil de cosir.

Com
esterilitzar els flascons
Cada
any en acabar l'experiment els rentem i endrecem.
El
dia abans de fer una sembra el bullim 20' en olla a pressió i els
deixem assecar girats cap per avall, guardant los en aquesta posició
fins fer los servir. |
|
El
medi de cultiu
o
com preparar les farinetes (aliment per a larves)
Les
proporcions serveixen per uns cent flascons
de cultiu:
|
preparat
A
250g de
farina
de blat de moro dissolts en 1.100cc d'aigua
dest.
preparat
B
6g de
Nipagín
(antifúngic d'ús alimentari) dissolts en 60cc d'etanol.
preparat
C
2.300cc
d'aigua dest.
+ 40g d'agar-agar
+ 6 cullerades soperes de sucre |
Remenar
C en fred i posar-ho al foc fins l'ebullició (remenant!).
Quan
C arrenca el bull afegir-hi el preparat A i mantenir l'ebullició
durant 15' (si espessa massa no cal arribar-hi, en 10' ja farem).
Retirar
del foc i afegir-hi el preparat B. Remoure la mescla.
| En
calent, abans que espessin les farinetes,
posar al fons de cada flascó esterilitzat d'1 a 2cm de pasta. Tapar
la boca del flascó amb paper d'alumini i deixar refredar. Poden
conservar-se alguns dies en frigorífic. |
|
Com
preparar un flascó de sembra
  |
Cal
treure el paper d'alumini i assecar les parets
interiors del flascó amb un paper net (sovint hi ha condensació).
Com aliment pels adults afegim un polsim de
llevat de panificació (poc i esmicolat)
vigilant que no toqui les parets. Hi posem a continuació un
paper no absorbent replegat, per tal d'augmentar
la superfície interior del flascó. Substituïm el paper
d'alumini per un tap d'escuma
(deixa passar l'aire però no les mosques. Finalment l'etiquetem
amb claredat (nom de la soca o creuament, data, grup responsable) |
Com
manipular les mosques
Ús
del pinzell
Per desplaçar, manipular
o agafar les mosques cal fer-ho amb un pinzell. |
|
Ús
de l'anestèsia
Al realitzar observacions
o encreuaments experimentals cal anestesiar prèviament les mosques.
Farem servir l'eteritzador que té un tap de cotó que més
endavant podrem mullar amb unes gotes d'èter
dietílic (volàtil i inflamable!!).
El procediment
a seguir és el següent:
Passar
les mosques al flascó eteritzador
Agafarem el pot
de cultiu i encara tapat donarem uns cops
secs sobre la taula, així evitarem que les mosques surtin,
tot seguit el destaparem i li posarem a sobre
l'eteritzador encarant les dues boques.
Subjectarem les dues boques
amb la mà per tal que no es separin i deixarem que les mosques passin
a l'eteritzador:
mètode
a: amb l'eteritzador en posició inferior, donarem copets
laterals al pot de cultiu comprovant que les mosques vagin baixant.
mètode
b: apuntant l'eteritzador
cap una bombeta aprofitant
així
el fototropisme
positiu de les mosques. |
 |
Quan hi hagi el nombre suficient
de mosques separarem els dos pots i els taparem
ràpidament.
Els alumnes solen abusar
dels cops i la farineta es desplaça enganxant-ho tot. També
tendeixen a fer passar massa mosques i després es desperten quan
encara no han enllestit la manipulació.
Eteritzar
les mosques
 |
Un cop
sec amb l'eteritzador sobre la taula farà baixar les mosques,
moment que aprofitarem per posar dues o tres gotes
d'èter en el tap de cotó, caldrà esperar que
les mosques es dormin. Una sobre exposició podrà matar les
(es nota perquè les ales queden excessivament separades del cos). |
|
Observar
les mosques
| Les mosques adormides podran
posar-se sobre un paper blanc i transportar
les a la lupa binocular per identificar les
i sexar les.
Després d'observar
les mosques mai s'han de tornar al flascó, seran dipositades en
un pot ple meitat d'aigua, meitat d'etanol que servirà de dipòsit |
 |
Si cal utilitzar les mosques
adormides en una nova sembra, no els posarem
directament sobre les farinetes ja que hi quedarien enganxades, utilitzarem
un cons de paper on amb el pinzell hi haurem
dipositat en cura les mosques.
Com
aconseguir femelles immadures (verges)
Sabem
que els adults no són madurs sexualment fins que no han passat de
sis a vuit hores des de la sortida de la pupa. De vegades en un creuament
necessitarem assegurar-nos que les femelles no han estat encara fecundades,
ens caldrà seleccionar femelles
que faci menys de vuit hores
que han sortit de la pupa.
Vegeu-ne
el procediment
per aconseguir-ho.
|